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抑菌圈檢測是利用待測抗菌物質在瓊脂平板上的擴散作用,使其周圍的細菌生長受到抑製,從(cong) 而形成透明的抑菌圈。抑菌圈的大小通常被用來判定待測物質的抑菌效價(jia) ,即其抑製細菌生長的能力。
抑菌圈檢測方法解析
抑菌圈檢測方法步驟
(1)準備材料及用具
培養(yang) 皿、無菌吸管或針筒、圓片濾紙、帶玻璃珠的無菌水、帶過濾漏鬥的三角板、鑷子、接種針(環)、熔化狀態的瓊脂培養(yang) 基、一定濃度的藥劑以及要測試的菌種。
還可以準備打孔器、牛津杯、不鏽鋼圓管等器皿及用品。
(2)製備菌懸液
從(cong) 純培養(yang) 物或臨(lin) 床樣本中獲取細菌,並使用適當的培養(yang) 基培養(yang) 至對數生長期。
用無菌生理鹽水或其他稀釋液將細菌製備成一定濃度的菌懸液,通常為(wei) 0.5麥氏比濁單位(相當於(yu) 1x10^8CFU/mL)。
(3)接種平板
將菌懸液均勻塗布在含有固態培養(yang) 基的平板上,如Mueller-Hinton瓊脂,確保平板表麵覆蓋且細菌分布均勻。
也可以采用傾(qing) 注平板法或預加菌液傾(qing) 注平板法製備試驗平板。
(4)放置抑菌劑
如果是使用擴散法(如牛津杯法),在平板上放置含有固定濃度抑菌劑的紙片或圓片濾紙(事先在不同濃度的抑菌劑中浸漬片刻)。
如果是使用其他方法,如微量稀釋法或宏量稀釋法,則在平板上或試管中加入不同濃度的抑菌劑溶液。
(5)培養(yang)
將接種好的平板放入恒溫培養(yang) 箱中,在推薦的溫度下(通常為(wei) 35-37°C)培養(yang) 一定時間(通常為(wei) 16-24小時)。
(6)讀取結果
培養(yang) 結束後,觀察抑菌劑紙片或圓片濾紙周圍的抑菌圈大小。
使用尺子測量抑菌圈直徑,以確定細菌對抑菌劑的敏感性。
(7)數據處理
對照樣品應無抑菌圈產(chan) 生,否則抑菌圈試驗無效。
抑菌圈數值可以取多個(ge) 樣品的平均值,並保留有效數字。
抑菌圈結果判定標準
抑菌圈結果判定標準主要依據抑菌圈直徑的大小來判斷細菌的敏感性或抑菌物質的抑菌效果。
具體(ti) 而言,抑菌圈直徑的大小反映了抑菌劑或藥物對微生物的抑製作用強弱。一般情況下,抑菌圈直徑判斷標準值的具體(ti) 區間為(wei) 15-30mm1.
不同的抑菌物質其抑菌效果有所差異,直徑較大通常意味著該物質對細菌的抑製作用較強,能在較大範圍內(nei) 阻止細菌的生長繁殖;而直徑較小則表示抑製效果相對較弱,可能需要更高濃度或更有效的物質才能達到理想的抑菌效果。
抑菌圈檢測方法解析